Satu Dunia Satu Pertarungan
─ Kerjasama antarabangsa untuk membina komuniti global takdir bersama yang bertindak balas terhadap covid-19 cabaran pandemik
Novel coronavirus yang menyapu di seluruh dunia telah mengakibatkan krisis pandemik Covid-19 global yang berterusan. Novel Coronavirus tidak mempunyai sempadan, tiada negara akan terhindar dari pertempuran ini melawan Covid-19. Sebagai tindak balas kepada pandemik Covid-19 di seluruh dunia ini, Liming Bio-Products Corp membuat sumbangan untuk menyokong kesejahteraan komuniti global kita.
Dunia kita kini berhadapan dengan kesan yang belum pernah terjadi sebelumnya dari Pandemik Penyakit Coronavirus 2019 (Covid-19). Sehingga kini, tidak ada ubat yang cekap untuk rawatan penyakit ini. Walau bagaimanapun, banyak ujian diagnostik telah dibangunkan untuk mengesan Covid-19. Ujian ini didasarkan pada kaedah molekul atau serologi untuk mengesan novel coronavirus spesifik asid nukleik atau biomarker antibodi. Sebagai Covid-19 telah mencapai status pandemik, diagnosis awal jangkitan coronavirus novel adalah kritikal dalam menilai penyebaran virus dan mengandunginya, tetapi ujian yang sempurna untuk penggunaan sejagat belum wujud. Kita perlu tahu ujian apa yang berpotensi digunakan untuk pemeriksaan, diagnosis, dan pemantauan jangkitan Covid-19, dan apakah batasan mereka. Adalah sangat penting bagaimana untuk memanfaatkan alat saintifik ini dan membantu mengenal pasti dan mengawal kemunculan penyakit yang menyebar dan serius ini.
Tujuan pengesanan coronavirus novel adalah untuk menentukan sama ada individu yang mempunyai jangkitan Covid-19 atau pembawa asimtotik yang boleh menyebarkan virus secara senyap-senyap, untuk memberikan maklumat penting untuk membimbing membuat keputusan untuk rawatan klinikal. Kajian terdahulu telah menunjukkan bahawa 70% keputusan klinikal bergantung kepada keputusan ujian. Apabila kaedah pengesanan yang berbeza digunakan, keperluan kit reagen pengesanan juga berbeza.
Rajah 1
Rajah1:Diagram menunjukkan peringkat utama tahap biomarker umum semasa kursus masa biasa jangkitan Covid-19. Paksi x menunjukkan bilangan hari jangkitan, dan paksi-y menunjukkan beban virus, kepekatan antigen, dan kepekatan antibodi dalam tempoh yang berbeza. Antibodi merujuk kepada antibodi IgM dan IgG. Kedua-dua RT-PCR dan pengesanan antigen digunakan untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan coronavirus novel, yang merupakan bukti langsung untuk pengesanan pesakit awal. Dalam masa seminggu jangkitan virus, pengesanan PCR, atau pengesanan antigen lebih disukai. Selepas jangkitan coronavirus novel selama kira -kira 7 hari, antibodi IgM terhadap novel coronavirus telah secara beransur -ansur meningkat dalam darah pesakit, tetapi tempoh kewujudannya adalah pendek, dan kepekatannya berkurangan dengan cepat. Sebaliknya, antibodi IgG terhadap virus muncul kemudian, biasanya kira -kira 14 hari selepas jangkitan virus. Kepekatan IgG secara beransur -ansur meningkat, dan ia berterusan dalam tempoh yang panjang dalam darah. Oleh itu, jika IgM dikesan dalam darah pesakit, ini bermakna bahawa virus baru -baru ini dijangkiti, yang merupakan penanda jangkitan awal. Apabila antibodi IgG dikesan dalam darah pesakit, ini bermakna jangkitan virus telah lama. Ia juga dipanggil jangkitan lewat atau jangkitan sebelumnya. Ia sering dilihat pada pesakit yang berada dalam fasa pemulihan.
Biomarker novel coronavirus
Coronavirus novel adalah virus RNA, yang terdiri daripada protein dan asid nukleik. Virus ini menyerang badan tuan rumah (manusia), memasuki sel -sel melalui tapak pengikat yang sepadan dengan reseptor ACE2, dan meniru dalam sel -sel tuan rumah, menyebabkan sistem imun manusia bertindak balas terhadap penceroboh asing dan menghasilkan antibodi tertentu. Oleh itu, asid nukleik dan antigen, dan antibodi tertentu terhadap coronavirus novel secara teorinya boleh digunakan sebagai biomarker khusus untuk mengesan coronavirus novel. Untuk pengesanan asid nukleik, teknologi RT-PCR adalah yang paling biasa digunakan, manakala kaedah serologi biasanya digunakan untuk mengesan antibodi khusus coronavirus novel. Pada masa ini, terdapat pelbagai kaedah ujian yang boleh kita pilih untuk menguji jangkitan Covid-19 [1].
Prinsip asas kaedah ujian utama untuk coronavirus novel
Banyak ujian diagnostik untuk Covid_19 boleh didapati setakat ini, dengan lebih banyak kit ujian menerima kelulusan di bawah kebenaran penggunaan kecemasan setiap hari. Walaupun perkembangan ujian baru yang dikeluarkan dengan begitu banyak nama dan format yang berbeza, semua ujian Covid_19 semasa pada dasarnya bergantung kepada dua teknologi utama: pengesanan asid nukleik untuk RNA virus dan immunoassays serologi yang mengesan antibodi khusus virus (IgM dan IgG).
01. Pengesanan Asid Nukleik
Reaksi rantaian transkripsi-polimerase (RT-PCR), penguatan isoterma yang dimediasi gelung (LAMP), dan penjujukan generasi akan datang (NGS) adalah kaedah asid nukleik biasa untuk mengesan RNA coronavirus novel. RT-PCR adalah jenis ujian pertama untuk Covid-19, yang disyorkan oleh Pertubuhan Kesihatan Sedunia (WHO) dan Pusat Kawalan dan Pencegahan Penyakit AS (CDC).
02. Pengesanan antibodi Serik
Antibodi adalah protein pelindung yang dihasilkan dalam tubuh manusia sebagai tindak balas terhadap jangkitan virus. IgM adalah jenis antibodi awal manakala IgG adalah antibodi jenis kemudian. Sampel serum atau plasma biasanya diperiksa untuk kehadiran jenis IgM dan IgG tertentu antibodi untuk penilaian fasa akut dan pemulihan jangkitan Covid-19. Kaedah pengesanan berasaskan antibodi ini termasuk assay immunochromatography emas koloid, lateks atau immunochromatography mikrosfera pendarfluor, assay immunosorbent berkaitan enzim (ELISA), dan ujian chemiluminescence.
03. Pengesanan antigen viral
Antigen adalah struktur pada virus yang diiktiraf oleh tubuh manusia yang mencetuskan sistem pertahanan imun untuk menghasilkan antibodi untuk membersihkan virus dari darah dan tisu. Antigen virus yang hadir pada virus boleh disasarkan dan dikesan dengan menggunakan immunoassay. Seperti RNA virus, antigen virus juga terdapat dalam saluran pernafasan individu yang dijangkiti dan boleh digunakan untuk mendiagnosis fasa akut jangkitan Covid-19. Oleh itu, sering disyorkan untuk mengumpul spesimen pernafasan atas seperti air liur, swab nasofaring dan oropharyngeal, sputum batuk yang mendalam, cecair lavage bronchoalveolar (BALF) untuk ujian antigen awal.
Memilih kaedah ujian untuk coronavirus novel
Memilih kaedah ujian melibatkan banyak faktor, termasuk penetapan klinikal, kawalan kualiti ujian, masa pemulihan, kos ujian, kaedah pengumpulan persampelan, keperluan teknikal kakitangan makmal, keperluan kemudahan dan peralatan. Pengesanan asid nukleik atau antigen virus adalah untuk memberikan bukti langsung tentang kehadiran virus dan mengesahkan diagnosis jangkitan coronavirus novel. Walaupun terdapat banyak kaedah untuk pengesanan antigen, sensitiviti pengesanan mereka terhadap coronavirus novel secara teorinya lebih rendah daripada penguatan RT-PCR. Ujian antibodi adalah pengesanan antibodi anti-virus yang dihasilkan dalam tubuh manusia, yang tertinggal dalam masa dan sering tidak dapat digunakan untuk pengesanan awal semasa fasa akut jangkitan virus. Tetapan klinikal untuk aplikasi pengesanan boleh berubah, dan tapak pengumpulan sampel juga mungkin berbeza. Untuk mengesan asid nukleik virus dan antigen, spesimen perlu dikumpulkan di saluran pernafasan di mana virus hadir, seperti swab nasofaring, swab oropharyngeal, sputum, atau cecair lavage bronchoalveolar (balf). Untuk pengesanan berasaskan antibodi, spesimen darah perlu dikumpulkan dan diperiksa untuk kehadiran antibodi anti-virus tertentu (IgM/IgG). Walau bagaimanapun, keputusan ujian antibodi dan asid nukleik boleh saling melengkapi. Sebagai contoh, apabila keputusan ujian adalah asid nukleik-negatif, IgM-negatif tetapi positif IgG, keputusan ini menunjukkan bahawa pesakit tidak membawa virus pada masa ini, tetapi telah pulih dari jangkitan novel coronavirus. [2]
Kelebihan dan Kekurangan Ujian Coronavirus Novel
Dalam protokol diagnosis dan rawatan untuk novel coronavirus pneumonia (percubaan versi7) (yang dikeluarkan oleh Suruhanjaya Kesihatan Negara & Pentadbiran Negeri Perubatan Tradisional Cina pada 3 Mac 2020), ujian asid nukleik digunakan sebagai kaedah standard emas untuk diagnosis novel Jangkitan coronavirus, manakala ujian antibodi juga dianggap sebagai salah satu kaedah pengesahan untuk diagnosis.
Penemuan patogen dan serologi
(1) Penemuan patogen: Asid nukleik coronavirus novel dapat dikesan dalam swab nasofaring, sputum, rembesan saluran pernafasan yang lebih rendah, darah, najis dan spesimen lain menggunakan kaedah RT-PCRAND/atau NGS. Lebih tepat jika spesimen diperolehi dari saluran pernafasan yang lebih rendah (pengekstrakan saluran udara atau udara). Spesimen hendaklah dikemukakan untuk ujian secepat mungkin selepas pengumpulan.
(2) penemuan serologi: IgM spesifik virus NCP menjadi dikesan sekitar 3-5 hari selepas permulaan; IgG mencapai titrasi sekurang-kurangnya 4 kali ganda semasa pemulihan berbanding dengan fasa akut.
Walau bagaimanapun, pemilihan kaedah ujian bergantung kepada lokasi geografi, peraturan perubatan, dan tetapan klinikal. Di Amerika Syarikat, NIH mengeluarkan garis panduan rawatan Coronavirus 2019 (Covid-19) (Covid-19) (Tapak Dikemaskini: 21 April 2019) dan FDA yang dikeluarkan Dasar untuk Ujian Diagnostik untuk Penyakit Coronavirus-2019 semasa Kecemasan Kesihatan Awam (Dikeluarkan pada 16 Mac, ), di mana ujian serologi antibodi IgM/IgG hanya dipilih sebagai ujian pemeriksaan.
Kaedah pengesanan asid nukleik
RT_PCR adalah ujian asid nukleik yang sangat sensitif yang direka untuk mengesan sama ada RNA coronavirus novel hadir dalam pernafasan atau spesimen lain. Hasil ujian PCR positif bermakna kehadiran RNA coronavirus novel dalam sampel untuk mengesahkan jangkitan Covid-19. Hasil ujian PCR negatif tidak bermakna ketiadaan jangkitan virus kerana ia boleh dipengaruhi oleh kualiti sampel yang lemah atau titik masa penyakit pada fasa pulih, dan lain -lain. Walaupun RT-PCR adalah ujian yang sangat sensitif, ia mempunyai beberapa kelemahan. Ujian RT-PCR boleh menjadi intensif buruh dan memakan masa, bergantung kepada kualiti sampel yang tinggi. Ini boleh menjadi satu cabaran kerana jumlah RNA virus bukan sahaja berbeza -beza antara pesakit yang berbeza tetapi juga boleh berbeza -beza dalam pesakit yang sama bergantung pada titik masa apabila sampel dikumpulkan serta fasa jangkitan atau permulaan gejala klinikal. Mengesan novel coronavirus memerlukan spesimen berkualiti tinggi yang mengandungi jumlah RNA virus utuh yang mencukupi.
Ujian RT-PCR mungkin memberikan hasil negatif yang salah (negatif palsu) bagi sesetengah pesakit yang mempunyai jangkitan Covid-19. Seperti yang kita ketahui, tapak jangkitan utama coronavirus novel terletak di paru -paru dan saluran pernafasan yang lebih rendah, seperti alveoli dan bronchi. Oleh itu, spesimen sputum dari batuk yang mendalam atau cecair lavage bronchoalveolar (BALF) dianggap mempunyai kepekaan tertinggi untuk pengesanan virus. Walau bagaimanapun, dalam amalan klinikal, sampel sering dikumpulkan dari saluran pernafasan atas dengan menggunakan swab nasopharyngeal atau oropharyngeal. Mengumpul spesimen ini bukan sahaja tidak selesa untuk pesakit tetapi juga memerlukan kakitangan yang terlatih. Untuk membuat persampelan kurang invasif atau lebih mudah, dalam beberapa kes, pesakit boleh diberi swab lisan dan membolehkan mereka mengambil sampel dari mukosa buccal atau lidah yang membuang diri. Tanpa RNA virus yang mencukupi, RT-qPCR boleh mengembalikan hasil ujian negatif palsu. Di wilayah Hubei, China, sensitiviti RT-PCR dalam pengesanan awal dilaporkan hanya kira-kira 30%-50%, dengan purata 40%. Kadar tinggi negatif palsu kemungkinan besar disebabkan oleh pensampelan yang tidak mencukupi.
Di samping itu, ujian RT-PCR memerlukan kakitangan yang terlatih untuk melaksanakan langkah pengekstrakan RNA yang kompleks dan prosedur penguatan PCR. Ia juga memerlukan tahap perlindungan biosafety yang lebih tinggi, kemudahan makmal khas, dan instrumen PCR masa nyata. Di China, ujian RT-PCR untuk pengesanan Covid-19 perlu dilakukan di Laboratorium Tahap 2 BioSafety (BSL-2), dengan perlindungan kakitangan menggunakan amalan biosafety Level 3 (BSL-3). Di bawah keperluan ini, dari awal bulan Januari hingga awal Februari 2020, kapasiti makmal CDC China Wuhan hanya dapat mengesan beberapa ratus kes sehari. Biasanya, ini tidak akan menjadi masalah apabila menguji penyakit berjangkit yang lain. Walau bagaimanapun, apabila berurusan dengan pandemik global seperti Covid-19 dengan berpotensi berjuta-juta orang untuk diuji, RT-PCR menjadi isu kritikal kerana keperluannya untuk kemudahan makmal khas atau peralatan teknikal. Kelemahan ini mungkin mengehadkan RT-PCR untuk digunakan sebagai alat yang cekap untuk pemeriksaan, dan juga boleh menyebabkan kelewatan dalam laporan keputusan ujian.
Kaedah pengesanan antibodi serologi
Dengan kemajuan kursus penyakit, terutamanya di peringkat pertengahan dan lewat, kadar pengesanan antibodi sangat tinggi. Satu kajian di Wuhan Central South Hospital menunjukkan bahawa kadar pengesanan antibodi dapat mencapai lebih dari 90% pada minggu ketiga jangkitan Covid-19. Juga, antibodi adalah hasil tindak balas imun manusia terhadap novel coronavirus. Ujian antibodi menawarkan beberapa kelebihan berbanding RT-PCR. Pertama, antibodi serologi ujian mudah dan cepat. Ujian aliran lateral antibodi boleh digunakan untuk point-of-care untuk menyampaikan hasil dalam 15 minit. Kedua, sasaran yang dikesan oleh ujian serologi adalah antibodi, yang diketahui lebih stabil daripada RNA virus. Semasa pengumpulan, pengangkutan, penyimpanan dan ujian, spesimen untuk ujian antibodi umumnya lebih stabil daripada spesimen untuk RT-PCR. Ketiga, kerana antibodi diedarkan secara merata dalam peredaran darah, terdapat kurang variasi pensampelan berbanding dengan ujian asid nukleik. Jumlah sampel yang diperlukan untuk ujian antibodi agak kecil. Sebagai contoh, 10 microliter darah-cangkul darah cukup digunakan dalam ujian aliran lateral antibodi.
Secara umum, ujian antibodi dipilih sebagai alat suplemen untuk pengesanan asid nukleik untuk meningkatkan kadar pengesanan coronavirus novel semasa kursus penyakit. Apabila ujian antibodi digunakan bersama-sama dengan ujian asid nukleik, ia boleh meningkatkan ketepatan ujian untuk diagnosis COVID19 dengan mengurangkan potensi hasil positif dan palsu palsu. Panduan Operasi Semasa tidak mengesyorkan menggunakan dua jenis ujian secara berasingan sebagai format pengesanan bebas tetapi harus digunakan sebagai format gabungan. [2]
Rajah2:Tafsiran yang betul mengenai asid nukleik dan keputusan ujian antibodi untuk mengesan jangkitan coronavirus novel
Rajah 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Novel Coronavirus IgM/IgG Antibodi Dual Rapid Test Kit (StrongStep®SARS-COV-2 IgM/IgG ujian pesat antibodi, immunochromatografi lateks)
Rajah 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-StrongStep®Novel Coronavirus (SARS-COV-2) Kit PCR masa nyata (pengesanan untuk tiga gen, kaedah siasatan pendarfluor).
Catatan:Kit PCR yang sangat sensitif dan siap digunakan ini boleh didapati dalam format lyophilized (proses pengeringan beku) untuk penyimpanan jangka panjang. Kit boleh diangkut dan disimpan pada suhu bilik dan stabil selama satu tahun. Setiap tiub premix mengandungi semua reagen yang diperlukan untuk penguatan PCR, termasuk transkripase terbalik, polimerase Taq, primer, probe, dan substrat dntp ke instrumen PCR untuk menjalankan penguatan.
Sebagai tindak balas kepada wabak coronavirus novel, Liming Bio-Products Co., Ltd. telah bekerja dengan cepat untuk membangunkan dua kit diagnostik untuk membolehkan makmal kesihatan klinikal dan awam dengan cepat mendiagnosis jangkitan Covid-19. Kit-kit ini sangat sesuai untuk digunakan untuk pemeriksaan berskala besar di negara-negara dan kawasan di mana wabak coronavirus novel cepat menyebar, dan untuk menyediakan diagnosis dan pengesahan untuk jangkitan Covid-19. Kit ini hanya digunakan di bawah Kebenaran Penggunaan Kecemasan yang telah diberi pra-notis (PEUA). Ujian adalah terhad kepada makmal yang diperakui di bawah peraturan pihak berkuasa kebangsaan atau tempatan.
Kaedah Pengesanan Antigen
1. Pengesanan antigen virus diklasifikasikan dalam kategori pengesanan langsung yang sama sebagai pengesanan asid nukleik. Kaedah pengesanan langsung ini mencari bukti patogen virus dalam spesimen dan boleh digunakan untuk diagnosis pengesahan. Walau bagaimanapun, perkembangan kit pengesanan antigen memerlukan kualiti antibodi monoklonal yang berkualiti tinggi dengan pertalian yang kuat dan sensitiviti tinggi yang mampu mengenali dan menangkap virus patogen. Ia biasanya mengambil masa lebih daripada enam bulan untuk memilih dan mengoptimumkan antibodi monoklonal yang sesuai untuk digunakan dalam penyediaan kit pengesanan antigen.
2. Pada masa ini, reagen untuk pengesanan langsung coronavirus novel masih dalam peringkat penyelidikan dan pembangunan. Oleh itu, tiada kit pengesanan antigen telah disahkan secara klinikal dan tersedia secara komersil. Walaupun sebelum ini dilaporkan bahawa firma diagnostik di Shenzhen telah membangunkan kit pengesanan antigen dan diuji secara klinikal di Sepanyol, kebolehpercayaan dan ketepatan ujian tidak dapat disahkan kerana kehadiran isu kualiti reagen. Sehingga kini, NMPA (bekas China FDA) tidak meluluskan sebarang kit pengesanan antigen untuk kegunaan klinikal. Kesimpulannya, pelbagai kaedah pengesanan telah dibangunkan. Setiap kaedah mempunyai kelebihan dan batasannya. Hasil dari kaedah yang berbeza boleh digunakan untuk pengesahan dan pelengkap.
3. Menghasilkan kit ujian Covid-19 yang berkualiti sangat bergantung kepada pengoptimuman semasa penyelidikan dan pembangunan. Liming Bio-Product Co., Ltd. Kit ujian diperlukan untuk memenuhi piawaian pembuatan dan kawalan kualiti yang ketat untuk memastikan mereka menyediakan tahap prestasi dan konsistensi tertinggi. Para saintis di Liming Bio-Product Co., Ltd. mempunyai pengalaman lebih dari dua puluh tahun dalam mereka bentuk, menguji, dan mengoptimumkan kit diagnostik in vitro untuk memastikan tahap prestasi tertinggi dalam kuantifikasi analisis.
Semasa pandemik Covid-19, kerajaan China menghadapi lonjakan permintaan yang besar untuk bahan pencegahan wabak di titik panas antarabangsa. Pada 5 April, pada sidang akhbar mekanisme pencegahan dan kawalan bersama Majlis Negeri "mengukuhkan pengurusan kualiti bahan perubatan dan mengawal selia perintah pasaran", Jiang Fan, pemeriksa peringkat pertama Jabatan Perdagangan Luar Negeri Perdagangan, berkata, "Seterusnya, kami akan memfokuskan usaha kami pada dua aspek, pertama, untuk mempercepat sokongan lebih banyak bekalan perubatan yang diperlukan oleh masyarakat antarabangsa, dan juga, untuk meningkatkan kawalan, peraturan, dan pengurusan produk. Kami akan memberi sumbangan China untuk menanggapi wabak global dan membina komuniti dengan masa depan yang dikongsi bersama untuk manusia.
Rajah 5:Liming Bio-Products Co., Ltd. Novel Coronavirus Reagent telah memperoleh Sijil Pendaftaran EU CE
Sijil Kehormat
Houshenshan
Rajah 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. menyokong Hospital Gunung Wuhan Vulcan (Houshenshan) untuk melawan wabak Covid-19 dan dianugerahkan Sijil Kehormat Wuhan Red Cross. Wuhan Vulcan Mountain Hospital adalah hospital paling terkenal di China yang mengkhususkan diri dalam rawatan Covid yang teruk - 19 pesakit.
Ketika wabak coronavirus novel terus menyebar ke seluruh dunia, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. sedang melangkah untuk menyokong dan membantu masyarakat di seluruh dunia dengan teknologi inovatif kami untuk melawan ancaman global yang belum pernah terjadi sebelumnya. Ujian pesat jangkitan Covid-19 adalah bahagian penting dalam menangani ancaman ini. Kami terus menyumbang dengan cara yang signifikan dengan menyediakan platform diagnostik berkualiti tinggi ke tangan pekerja penjagaan kesihatan barisan hadapan supaya orang dapat menerima hasil ujian kritikal yang mereka perlukan. Usaha Liming Bio-Products Co., Ltd. dalam pertempuran melawan pandemik Covid-19 adalah untuk menyumbang teknologi, pengalaman, dan kepakaran kami kepada komuniti antarabangsa untuk pembinaan masyarakat global takdir.
Tekan panjang ~ Imbas dan ikuti kami
E -mel: sales@limingbio.com
Laman web: https://limingbio.com
Masa Post: Mei-01-2020
