Yang manakah kaedah terbaik?
—Ujian untuk Diagnosis Jangkitan SARS-CoV-2
Bagi kes COVID-19 yang disahkan, simptom klinikal yang biasa dilaporkan termasuk demam, batuk, myalgia atau keletihan.Namun simptom ini bukanlah ciri unik COVID-19 kerana simptom ini serupa dengan penyakit lain yang dijangkiti virus seperti influenza.Pada masa ini, asid nukleik virus PCR Masa Nyata (rt-PCR), pengimejan CT dan beberapa parameter hematologi adalah alat utama untuk diagnosis klinikal jangkitan.Banyak kit ujian makmal telah dibangunkan dan digunakan dalam ujian spesimen pesakit untuk COVID-19 oleh CDC Cina1, CDC AS2dan syarikat swasta lain.Ujian antibodi IgG/IgM, kaedah ujian serologi, juga telah ditambah sebagai kriteria diagnostik dalam versi terkini China bagi garis panduan diagnosis dan rawatan untuk penyakit novel coronavirus (COVID-19), yang dikeluarkan pada 3 Mac.1.Ujian rt-PCR asid nukleik virus masih merupakan kaedah diagnostik standard semasa untuk diagnosis COVID-19.
StrongStep®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Kit PCR Masa Nyata Berbilang (pengesanan untuk tiga gen)
Namun kit ujian PCR masa nyata ini, mencari bahan genetik virus, contohnya dalam sapuan hidung, mulut atau dubur, mengalami banyak batasan:
1) Ujian ini mempunyai masa pemulihan yang panjang dan rumit dalam operasi;mereka biasanya mengambil masa purata lebih 2 hingga 3 jam untuk menjana hasil.
2) Ujian PCR memerlukan makmal yang diperakui, peralatan mahal dan juruteknik terlatih untuk beroperasi.
3) Terdapat beberapa bilangan negatif palsu untuk rt-PCR COVID-19.Ia mungkin disebabkan oleh viral load SARS-CoV-2 yang rendah dalam spesimen swab pernafasan atas ( Novel coronavirus terutamanya menjangkiti saluran pernafasan bawah, seperti alveoli pulmonari ) dan ujian tidak dapat mengenal pasti orang yang telah melalui jangkitan, pulih, dan membersihkan virus dari badan mereka.
Penyelidikan oleh Lirong Zou et al4mendapati viral load yang lebih tinggi dikesan sejurus selepas permulaan simptom, dengan viral load yang lebih tinggi dikesan di hidung berbanding di tekak dan corak penumpahan asid nukleik virus pesakit yang dijangkiti SARS-CoV-2 menyerupai pesakit influenza.4dan kelihatan berbeza daripada yang dilihat pada pesakit yang dijangkiti SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5memeriksa sampel bersiri (sapuan tekak, kahak, air kencing, dan najis) daripada dua pesakit di Beijing dan mendapati bahawa viral load dalam swab tekak dan sampel kahak memuncak pada kira-kira 5-6 hari selepas timbulnya gejala, sampel kahak biasanya menunjukkan beban virus yang lebih tinggi daripada sampel sapuan tekak.Tiada RNA virus dikesan dalam sampel air kencing atau najis daripada kedua-dua pesakit ini.
Ujian PCR hanya memberi keputusan positif apabila virus masih ada.Ujian tidak dapat mengenal pasti orang yang mengalami jangkitan, pulih dan membersihkan virus daripada badan mereka.Sebenarnya, hanya kira-kira 30%-50% positif PCR pada pesakit dengan pneumonia coronavirus novel yang didiagnosis secara klinikal.Ramai pesakit pneumonia coronavirus novel tidak dapat didiagnosis kerana ujian asid nukleik negatif, jadi mereka tidak boleh mendapatkan rawatan yang sepadan dalam masa.Dari garis panduan edisi pertama hingga keenam, bergantung semata-mata pada asas diagnosis keputusan ujian asid nukleik, yang menyebabkan masalah besar kepada doktor. "Pemberi maklumat" terawal, Dr. Li Wenliang, pakar oftalmologi di Pusat Wuhan Hospital, sudah mati.Semasa hayatnya, dia menjalani tiga ujian asid nukleik dalam kes demam dan batuk, dan kali terakhir dia mendapat keputusan positif PCR.
Selepas perbincangan oleh pakar, ia telah memutuskan untuk meningkatkan kaedah ujian serum sebagai kriteria diagnostik baru.Walaupun ujian antibodi, juga dipanggil ujian serologi, yang boleh mengesahkan sama ada seseorang telah dijangkiti walaupun selepas sistem imun mereka telah membersihkan virus yang menyebabkan COVID-19.
Ujian Pantas Antibodi IgG/IgM StrongStep® SARS-COV-2
Ujian antibodi IgG/IgM akan membantu mengesan dalam cara yang lebih berasaskan populasi yang telah dijangkiti, kerana banyak kes nampaknya merebak daripada pesakit tanpa gejala yang tidak dapat dikenal pasti dengan mudah.Sepasang suami isteri di Singapura, suami positif PCR, keputusan ujian PCR isteri negatif, tetapi keputusan ujian antibodi menunjukkan dia mempunyai antibodi, begitu juga dengan suaminya.
Ujian serologi perlu disahkan dengan teliti untuk memastikan ia bertindak balas dengan pasti, tetapi hanya kepada antibodi terhadap virus novel.Satu kebimbangan ialah persamaan antara virus yang menyebabkan sindrom pernafasan akut yang teruk dan COVID-19 boleh membawa kepada kereaktifan silang.IgG-IgM yang dibangunkan oleh Xue Feng wang6dianggap boleh digunakan sebagai ujian titik penjagaan (POCT), kerana ia boleh dilakukan berhampiran sisi katil dengan darah batang jari.Kit mempunyai sensitiviti 88.66% dan kekhususan 90.63%.Walau bagaimanapun, masih terdapat keputusan positif palsu dan negatif palsu.
Dalam versi terkini China bagi garis panduan diagnosis dan rawatan untuk penyakit novel coronavirus (COVID-19)1, kes yang disahkan ditakrifkan sebagai kes yang disyaki yang memenuhi mana-mana satu daripada kriteria berikut:
(1)Sampel saluran pernafasan, darah atau spesimen najis yang diuji positif untuk asid nukleik SARS-CoV-2 menggunakan rt-PCR;
(2) Penjujukan genetik virus daripada sampel spesimen saluran pernafasan, darah atau najis adalah sangat homolog dengan SARS-CoV-2 yang diketahui;
(3)Serum novel coronavirus antibodi IgM khusus dan antibodi IgG adalah positif;
(4) Antibodi IgG khusus coronavirus serum berubah daripada negatif kepada positif atau antibodi IgG khusus coronavirus semasa tempoh pemulihan adalah 4 kali lebih tinggi daripada itu semasa tempoh akut.
Diagnosis dan rawatan COVID-19
| Garis panduan | Diterbitkan | Kriteria diagnostik yang disahkan |
| Versi ke-7 | 3Mac.2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versi ke-6 | 18 Feb.2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Rujukan
1. Garis panduan untuk diagnosis dan rawatan pneumonia coronavirus novel (percubaan versi 7, Suruhanjaya Kesihatan Kebangsaan Republik Rakyat China, dikeluarkan pada 3 Mac 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Penggunaan Penyelidikan Hanya Protokol RT-PCR Masa Nyata untuk Pengenalpastian 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapura mendakwa penggunaan pertama ujian antibodi untuk mengesan jangkitan coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.SARS-CoV-2 Viral Load dalam Spesimen Pernafasan Atas Pesakit Dijangkiti 19 Februari 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5.Viral SARS-CoV-2 dalam sampel klinikal Lancet Infect Dis 2020 Diterbitkan Dalam Talian 24 Februari 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Perkembangan dan Aplikasi Klinikal Ujian Antibodi Gabungan IgM-IgG Pantas untuk SARS-CoV-2
Diagnosis Jangkitan XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Masa siaran: Mac-17-2020
